摘 要：
目的:研究含复方中药提取物牙膏的抗炎、镇痛、止血等药理作用。方法:采用对二甲苯致小白鼠耳廓急性炎症肿胀法考察抗炎作用;采用对小白鼠热板法考察镇痛作用;采用对兔肝脏局部创面损伤出血法考察止血作用。结果:与空白对照组比较，牙膏样品能显著减轻小白鼠急性炎症肿胀耳廓的重量，能明显抑制二甲苯所致小白鼠耳廓急性炎症肿胀(P <0.01);与空白对照组比较，牙膏样品能显著提高小白鼠痛阈值(P <0.05);与空白对照组比较，牙膏样品对兔肝脏局部创面损伤出血有明显的止血效果(P <0.001)。结论:含该复方中药提取的牙膏具有明显的抗炎、镇痛和止血作用，为开发具有较好养龈固齿功效牙膏提供可靠的理论依据。
关键词：
复方中药提取物 牙膏 抗炎作用 镇痛作用 止血作用
据有关资料统计，目前在我国有超过90%以上的人有牙龈问题，牙龈问题主要包括牙龈炎、牙周炎，初期症状表现为牙龈出血、红肿、疼痛等[1]。如果牙龈问题得不到及时防治，会出现越来越严重的肿痛和出血症状，最终会导致牙齿的脱落[2]。本研究通过查阅大量文献资料[3]，筛选出几味中药进行组方，通过现代中药技术提取其中的活性成分，将提取物按一定量添加到牙膏中，通过抗炎、镇痛和止血作用的药理实验，研究牙膏的功效，为开发具有较好养龈固齿功效的牙膏提供可靠理论依据。
1 材料
1.1 中药组方
组方由两面针、生地黄、独活、骨碎补等四味中药材组成。
1.2 提取工艺
按处方称量好药材放于圆底烧瓶中，用3倍的75%乙醇溶液浸泡过面，放置12小时，采用加热回流法在95℃水浴锅中提取3小时，倒出第一次提取液。再按前述方法提取第二次。将两次提取液合并，在真空条件下浓缩至生药量∶提取物=1∶1，备用。
1.3 试验样品
按一定量添加到牙膏制成复方中药提取物牙膏;牙膏空白样品除不添加中药提取物外，其它成分与试验样品一致。
1.4 试药
醋酸氟轻松乳膏，天津太平洋制药有限公司生产，国药准字H12020838，产品批号:8414133，生产日期:20140704，有效期至201706;双氯芬酸二乙胺乳胶剂，北京诺华制药有限公司生产，国药准字H19990291，产品批号:X4193，生产日期:201304，有效期至201603;云南白药粉，云南白药集团股份有限公司生产，国药准字Z53020798，产品批号:ZDA1401，生产日期:20140310，有效期至201802;医用淀粉，广东德峰淀粉糖业有限公司淀粉厂生产，批号:20140306。
1.5 实验动物
昆明种小白鼠，SPF级，体重18～22g;健康白色家兔，普通级，体重2.0～2.5kg;实验动物均由广西壮族自治区实验动物中心提供，许可证号:SCXK桂2009-0002。
1.6 实验仪器
FA1004型电子分析天平，中华人民共和国上海精科天平厂生产;GJ-8402型热板测痛仪，宁海白石电子医药仪器厂生产。
2 方法与结果[4]
2.1 对二甲苯致小白鼠耳廓急性炎症肿胀的抗炎作用
选取体重18～22g健康昆明种♂小白鼠40只，随机均分4组，每组10只。空白对照组(生理盐水0.1m L/只)，牙膏空白组(牙膏空白0.1g/只)，阳性药醋酸氟轻松乳膏组(醋酸氟轻松乳膏0.1g/只)，牙膏样品组(牙膏0.1g/只)。实验时各组每只动物右耳廓内外两面均匀涂抹二甲苯0.1m L/只致炎，左耳不加处理作自身空白对照。涂抹二甲苯30min后，各组每只动物右耳廓内外两面分别均匀涂抹各组受试物样品0.1g/只。给予受试物1 h后，小白鼠颈椎脱臼处死，剪下两耳廓，用生理盐水洗去右耳廓受试物样品，干棉球擦净，重叠两耳廓，用内径8 mm的打孔器在同一部位凿取两圆耳片，分别在FA1004型电子分析天平上称重，右耳片重量减去左耳片重量为肿胀值，数据进行统计学t检验，结果见表1。
表1 牙膏对二甲苯所致小白鼠耳廓急性炎症肿胀的影响
2.2 对小白鼠的镇痛作用(热板法)
选取体重18～22g健康昆明种♀小白鼠，用GJ-8402型热板测痛仪，调节控制温度在55±0.5℃，将小白鼠放在热板上测定每鼠的痛阈值(小白鼠接触热板至舔后足的时间)，凡舔后足时间小于5s或大于30s及跳跃者弃之不用，挑选合格小白鼠40只，随机均分4组，每组10只。空白对照组、牙膏空白基质组、阳性药双氯芬酸二乙胺乳胶剂组、牙膏样品组。各组小白鼠按同法重复2次测定小白鼠的正常痛阈值，每次间隔15min，取两次正常痛阈值平均值，做为该组小白鼠给药前的痛阈值。分别于各组动物每鼠4个足跖外用涂予相应受试物0.2g/只，空白对照组外用涂予生理盐水0.2m L/只，外用涂予受试物后15min、30min、45min按同法分别测定小白鼠的痛阈值，如小白鼠60s仍无反应，将小白鼠取出，以免烫伤，其痛阈值以60s计算，记录各组小白鼠痛阈值，数据进行统计学t检验，结果见表2。
表2 牙膏对小白鼠的镇痛作用(热板法)
2.3 对兔肝脏局部创面损伤出血的止血作用
取健康白色家兔20只，体重2.0～2.5kg，雌雄兼用。用3%戊巴比妥钠30mg/kg耳缘静脉缓慢注入，家兔麻醉后，仰卧固定于手术台上，腹部正中切口长约6～8cm，暴露并固定肝脏，用手术剪在肝左叶切去肝脏组织长约1cm，宽约1cm，高约1cm，创面呈喷射样出血。擦去喷出的血后，立即在创面局部敷涂待试物样品1g，纱布复盖，以200g砝码压迫1min,1min后移去砝码，观察止血效果，以不出血为止血，如仍出血，则加敷涂待试物样品后继续加压，每隔30s观察一次，记录止血时间，如超过3min仍然出血，则记为未能止血，止血时间记为>3min。每次样品测试后，用37℃生理盐水洗去残留受试物，使创面重新出血，再测试下一受试物样品。每只兔子进行四次肝脏局部创面损伤止血测试实验，各受试物样品按拉丁方程序敷药，以减少肝脏局部创面损伤切口差异和用药顺序的影响。每个受试物样品总计进行20次兔肝脏局部创面损伤出血的止血实验。止血效果按倒数计分法(10/T)记为分值F,3min以上未能止血，F无分值记为0。记录并进行统计学t检验，结果见表3。
表3牙膏对兔肝脏局部创面损伤出血的止血效果
3 讨论
本研究采用的中药处方为两面针、生地黄、独活、骨碎补。两面针为芸香科植物两面针Zanthoxylum nitidum (Roxb.) DC.的干燥根，归肝和胃经，具有行气止痛、活血化瘀、祛风通络等作用，此为君药;骨碎补为水龙骨科植物槲蕨Drynaria fortunei (Kunze)J.Sm.的干燥根茎，归肝、肾经、具有疗伤止痛，补肾强骨等作用，用于跌扑闪挫、筋骨折伤、肾虚腰痛、筋骨痿软、耳鸣耳聋、牙齿松动等，作为处方的臣药;生地黄为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.的新鲜或干燥块根，归心、肝、肾经，具有清热生津、凉血、止血等作用，可用于热病伤阴、舌绛烦渴、温毒发斑、吐血、衄血、咽喉肿痛等，为处方的佐药之一;独活为伞形科植物重齿毛当归Angelica pubescens Maxim.f.biserrata Shan et Yuan的干燥根，归肾、膀胱经，具有祛风除湿、通痹止痛等作用，可用于风寒湿痹、腰膝疼痛、风寒挟湿等，为处方的佐药之一[5,6]。
以上述中药组方，提取其中的有效成分，按一定量添加到牙膏中进行药理实验。药理实验结果表明，与空白组比较，牙膏样品组和醋酸氟轻松乳膏组均能使小白鼠急性炎症肿胀耳廓重量显著减轻，明显抑制二甲苯所致小白鼠耳廓急性炎症肿胀，表明牙膏样品对急性炎症具有明显的抗炎作用;牙膏样品组和双氯芬酸二乙胺乳胶剂组与给药前及空白对照组比较，均能显著提高小白鼠痛阈值，牙膏样品组与牙膏空白基质组比较，能显著提高小白鼠痛阈值，表明牙膏样品具有明显的镇痛作用;与空白组比较，牙膏样品组和云南白药组均对兔肝脏局部创面损伤出血有明显的止血效果，具有明显的止血作用，表明牙膏样品具有明显的止血作用。根据该研究结果，开发出的两面针养龈固齿牙膏，经消费者使用后反映，对防治牙龈出血、肿痛、牙齿松动等牙龈问题具有较好效果。
参考文献
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[2]刘彩虹，郑红，张露蓉.中药含漱液治疗固定矫治患者牙龈炎的临床研究[J].实用口腔医学杂志，2016,32(6):865-866.
[3]万呼春，胡德渝，刘红春，等.含中药两面针提取液牙膏对牙菌斑和牙龈炎的观察[J].中国中西医杂志，2005,25(11):1024-1026.
[4]广西中医药研究院.两面针中药养龈固齿牙膏抗炎、镇痛和止血作用的药理实验报告[R]. 20141014.
[5]国家药典委员会．中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社，2015.
[6]南京中医药大学．中药大辞典(第二版)[M]．上海:上海科学技术出版社[M],2008.
